公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

一、商品介紹：

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

     b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

IFNA13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 大鼠循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA試劑盒 Fish Tri-iodothyronine,T3  魚(yú)類(lèi)狀腺原酸 96T

Monoamine oxidase A+B： 單氧化酶A+B抗體 CN4 Others Human 人 Coactin 4 / CN4 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

大鼠破骨細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠血幼素(HJV)ELISA試劑盒 Amylin (Rabbit Amylin )  兔胰淀素 96T

MIR16： 膜蛋白相互作用蛋白RGS16抗體 MDA-MB-231, 人癌細(xì)胞 骨髓瘤,P3-X63-Ag8細(xì)胞 SW 1271 [SW-1271; SW1271](人肺腺癌細(xì)胞)

GPR114 Others Human 人 GPR114 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒 AFP-L2  小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2 96T

129小鼠胚胎干細(xì)胞 The 129 mouse embryonic stem cells 人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA 試劑盒 CCL14/HCC-1(C-C motif chemokine 14) 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白14抗原 0.5mg

H2A1J： H2A組蛋白家族E蛋白抗體 豬腎細(xì)胞;PK(15) 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞，NK-92MI細(xì)胞 U27細(xì)胞，KM小鼠子瘤株

PNLIPRP2 Others Human 人 Galactolipase / PNLIPRP2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF-1)ELISA試劑盒 ABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原 0.2mg

H2BFM： H2B組蛋白家族M蛋白抗體 CL-0276H-97(人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

A-204細(xì)胞，人橫紋肌肉瘤細(xì)胞 兩歧雙歧桿菌 人肝永生化細(xì)胞;THLE-3 人基質(zhì)裂解素(ST3)ELISA 試劑盒 MIP-3 beta/ELC/CCL19(Macrophage Inflammatory Protein 3 Beta) 巨噬細(xì)胞炎性蛋白19抗原 0.5mg

EA.hy926人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞Ca Ski人腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Ca human cervical carcinoma Ski cells in iestinal metastasis RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒 ACA-IgG(Human anti-cardiolipin antibody IgG)  人抗心0脂抗體 PDCD1LG2 Others Human 人 PD-L2 / B7-DC / CD273 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6 大鼠骨膜蛋白(POSTN)ELISA試劑盒 TNFsR- I  大鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ 96T

P73 protein： P73抑制基因抗體 小型豬腎細(xì)胞;MPK

小鼠淋巴纖維細(xì)胞(MLF)(5×105) MiaPaCa-2, 人胰腺癌細(xì)胞 Human 大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒 AGAA(Human anti-golgi apparatus antibody)  人抗高爾基體抗體 扁桃體上皮細(xì)胞培養(yǎng)基TEpiCM

FAM3D Protein Mouse 重組小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (His 標(biāo)簽) 大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA 試劑盒 TNFsR- II  大鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ 96T