公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

二、細胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。

     b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項 

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

MLCK： 肌球蛋白輕鏈激酶抗體 HEp-2細胞，喉表皮樣癌細胞 人食管鱗癌,KYSE70細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1

NRG1 Others Human 人 NRG1-alpha (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠(VA)ELISA試劑盒 APC(Mouse activated protein C)  小鼠活化蛋白C 96T

MPS1： 單極紡錘體蛋白激酶1抗體 人晶狀體上皮細胞裂解物HLEpiCL

Sf9昆蟲卵巢細胞 Sf9 insect ovarian cells GPM-115無血清無蛋白昆蟲細胞懸浮培養(yǎng)基(金普諾安 Cat#GPM001L01) 大鼠(VA)ELISA 試劑盒 a-Glu(Mouse Alpha-Glucosidase)  小鼠α葡萄糖苷酶 96T

Mad2L2： 有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2抗體 HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

PTGDS Others Human 人 PTGDS / L-PGDS 人細胞裂解液 (陽性對照) 人補體因子H(CFH)ELISA 試劑盒 Ki-67(Antigen identified by monoclonal antibody Ki 67) Ki-67 Antigen 0.5mg

ID3： DNA結(jié)合抑制因子3抗體 CM-R055大鼠卵巢成纖維細胞培養(yǎng)基100mL

7WPS1細胞，人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株 變異鏈球菌 兔間變表皮鱗癌瘤株;VX2 人補體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)ELISA 試劑盒 Klf4 (Kruppel likefactor 4) 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子抗原 0.5mg

CD275： 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子配體CD275抗體 GRN Others Mouse 小鼠 GRN / Granulin 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠漿細胞瘤;MPC-11 人補體受體1(CR1/CD35)ELISA試劑盒 phospho-KLF5/Krueppel-like factor 5 (pSer272) 0酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗原 0.5mg

KTC-1人甲狀腺癌細胞PANC-1 人胰腺癌細胞 大鼠催乳素(PRL)ELISA 試劑盒 Apo C3(Human Apolipoprotein C3)  人載脂蛋白C3 96T

RNF74： 環(huán)指蛋白74抗體 H-4-II-E細胞，大鼠肝細胞瘤 人卵巢癌細胞,Caov-3細胞 人髓核細胞裂解物HNPCL

BLNK Others Human 人 BLNK 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠催產(chǎn)素受體(OX)ELISA試劑盒 CH(Human cholesterol)  人血清總 96T

RAG2： 重組激活基因2蛋白抗體 家貓腎細胞;CATK1

CL-0458U-118 MG(人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤)5×106cells/瓶×2 大鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒 MT2(Human Metallothionein 2)  人金屬硫蛋白2 96T