公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

     b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

NKB： 神經(jīng)激肽B抗體 P815細(xì)胞，肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞 人胃癌耐藥株,SGC7901/DDP細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2

IgG2 Others Human 人 IgG2-Fc (257 Ser/Ala) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 大鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(EM-1)ELISA試劑盒 AcSDKP(Mouse N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro)  小鼠N-乙?；?span>-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸 96T

Neurocan： 神經(jīng)粘蛋白抗體 髓核細(xì)胞生長添加物NPCGS

SV40 MES 13小鼠腎小球系膜細(xì)胞 SV40 MES 13 in mouse glomerular mesangial cells DMEM培養(yǎng)基+5%FBS 大鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(EM-1)ELISA 試劑盒 AGEs  大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物 96T

Neurofascin： 神經(jīng)束蛋白抗體 RK2 Others Human 人 RK2 / k-B / KB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

LILRA5 Others Rat 大鼠 LILRA5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 人白喉抗體(Diphtheria Ab)ELISA 試劑盒 P73 protein P73抑制基因抗原 0.5mg

ILK-1： 整合素連接激酶-1抗體 CM-H031人食管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

MA-891細(xì)胞，小鼠癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 L929(成纖維細(xì)胞) 人葡萄膜黑色素細(xì)胞;UM 人白C 抗原(DR15)ELISA試劑盒 p70 S6 Kinase/P70 Beta1 p70S6Kb抗原 0.5mg

phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180)： 0酸化KB抑制蛋白激酶α抗體 TDGF1 Others Human 人 TDGF1 / CRGF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人肝癌細(xì)胞;Hep G2 [HepG2] 人靶向核糖核酸酶()ELISA 試劑盒 PALB2(partner and locaizer of BRCA2) 癌易感基因相關(guān)蛋白2 0.5mg

MDA-MB-468人乳腺癌細(xì)胞RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 大鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒 OPG(Human Osteoprotegerin)  人骨保護(hù)素 96T

phospho-P (Ser153)： 0酸化Raf激酶抑制蛋白抗體 IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

SK-OV-3 人卵巢腺癌細(xì)胞 大鼠補(bǔ)體片斷3(C3)ELISA試劑盒 BMPR- II (Human Bone morphogenetic protein receptor II )  人骨成型蛋白受體Ⅱ 96T

RERE： 肌相關(guān)蛋白1抗體 OS-732細(xì)胞，骨肉瘤細(xì)胞(瘤株) 人細(xì)胞,SiHa細(xì)胞 人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞總RNAHA-sp NA

ITGA6 & ITGB1 Others Human 人 ITGA6 & ITGB1 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 大鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒 BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A)  人骨成型蛋白受體1A 96T