悉尼馬爾太蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)組成及試劑配制:
1、 酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
悉尼馬爾太蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、悉尼馬爾太蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)樣本采集：各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
    1.特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
    4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
    5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

    6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白4抗體 英文縮寫(xiě)： CKAP4

肌肽二肽酶1抗體 英文縮寫(xiě)： CNDP1

酸性線粒體肌酸激酶抗體 英文縮寫(xiě)： CKMT

碳酸酐酶相關(guān)蛋白8抗體 英文縮寫(xiě)： CA8

鈣通道電壓依賴(lài)性β1蛋白抗體 英文縮寫(xiě)： CACNB1

原癌基因CD39樣蛋白4抗體 英文縮寫(xiě)： CD39L4

膠原樣蛋白抗體 英文縮寫(xiě)： COL20A1

腫瘤易感性候選基因5抗體 英文縮寫(xiě)： CASC5

鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體 英文縮寫(xiě)： CAMKK2

中心體肌動(dòng)蛋白γ1/增強(qiáng)型PI3K蛋白抗體 英文縮寫(xiě)： Centaurin gamma 1

細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體 英文縮寫(xiě)： CDCA7L

半胱胺酸蛋白酶-2抗體 英文縮寫(xiě)： Caspase 2

7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框63抗體 英文縮寫(xiě)： C7orf63

CD2結(jié)合蛋白3抗體 英文縮寫(xiě)： CD2BP3

膠原三股螺旋重復(fù)蛋白1抗體 英文縮寫(xiě)： CTHRC1

20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框72抗體 英文縮寫(xiě)： c20orf72

2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框6抗體 英文縮寫(xiě)： C2orf6

CD318抗體 英文縮寫(xiě)： CDCP1

著絲粒蛋白B抗體 英文縮寫(xiě)： CENPB

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框111抗體 英文縮寫(xiě)： C1ORF111

19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框80抗體 英文縮寫(xiě)： C19orf80

悉尼馬爾太蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)半雙加氧酶1抗體 英文縮寫(xiě)： CDO1

膠原蛋白11A2抗體 英文縮寫(xiě)： Collagen XI alpha 2

CUL4B蛋白抗體 英文縮寫(xiě)： Cullin 4B

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框103抗體 英文縮寫(xiě)： C1orf103