訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：豬肺炎支原體（MHP）核酸定性檢測試劑盒
規(guī)格：50T
編號：BH-P96993
分類：熒光PCR法
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
EL4細(xì)胞，小鼠瘤細(xì)胞 3T3-Swiss albino(胚胎成纖維細(xì)胞) 肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;AE1201鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液（500mg/L,溶劑：水）Chromium solution500mg/L,溶劑：水

CXCL1 Protein Human 重組 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽)鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液（100µg/mL,基體：水）Chromium solution100µg/mL,基體：水

SCaBER(膀胱鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2  FSH alpha / TSH alpha / CGA 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液（500mg/L,溶劑：1%鹽酸） Cobalt standard500mg/L,溶劑：1%鹽酸

胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液（100(20℃)µg/mL,基體: 1%HNO3） Cobalt standard100(20℃)µg/mL,基體: 1%HNO3

大鼠雪旺細(xì)胞(RSC)(5×105)鏑標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml）Dysprosium standard1000μg/ml
CL-0148MADB106(大鼠癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×21-十一烷基磺酸鈉[離子對色譜級]離子對色譜用試劑IPC-ALKS-11

SELL Others Cynomolgus 食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-十二烷基磺酸鈉[離子對色譜級]離子對色譜用試劑IPC-ALKS-12

前列腺上皮細(xì)胞裂解物HPEpiCL1-十三烷磺酸鈉[離子對色譜級]離子對色譜用試劑IPC-ALKS-13

1590細(xì)胞，癌細(xì)胞系 小鼠瘤,EL-4細(xì)胞 腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells　5 × 105方(1ml)十二烷基鈉[離子對色譜級]離子對色譜用試劑IPC-SDS

Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21-PP1萘99%，santa進(jìn)口原裝sc-2037651-Naphthyl PP1
豬肺炎支原體（MHP）核酸定性檢測試劑盒CD4 Others Ferret 雪貂 CD4 / Leu-3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-GlutamineD-谷酸-5-酰胺5克BR，99%

MHCC97-H 高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞三基醋銫 98% Cqsium 2,2-dimqthylpropcnoctq, Cqsium trimqthylccqtctq 044-70-0

CL-0402NCI-H520(肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×22′-脫氧胸苷-5′-三嶙酸四鈉鹽shēng huà shì jì容量：RT1克

MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元BASICFUCHSIN,CERTIFIABLE堿性品紅生物染料級暗綠色粉末RTsigma

胚肺細(xì)胞系;KuMA 肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL二甲1，1.2M 溶液DImetxYLZINC
檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。